Como la mayoría de las células y matrices extracelulares no poseen un color propio por lo que su observación directa al microscopio óptico no permite observar sus características morfológicas. Para poder observarlos se emplean técnicas donde se colorean de manera más o menos específica a determinadas estructuras del tejido.
La tinción Hematoxilina-Eosina, es un método de tinción de rutina en histología y citología. Es una tinción basada en dos etapas, la primera una tinción nuclear por un colorante básico (hematoxilina) y la segunda, una tinción citoplasmática por un colorante xantenico ácido (eosina). La hematoxilina en combinación con sales
de aluminio, hierro o cromo, forma un colorante activo, la hemateina, formada por oxidación de la hematoxilina. Este se usa como colorante nuclear, tiñendo los núcleos de color azul/negro y aportando un buen detalle de los mismos. Por este motivo, se suele usar junto con un colorante citoplasmático, generalmente la eosina, que aporta una gradación entre el rosa, y el rojo a las estructuras y matrices celulares de carácter catiónico (a las que la hematoxilina no tiñe o lo hace muy débilmente). Se consigue así un buen contraste de las preparaciones microscópicas facilitando
su observación.
La técnica consiste en:
- Desparafinar con Pathoclear Plus o Xileno durante 30 minutos a temperatura ambiente.
- Realizar un pasaje por alcohol 100° (aproximadamente 2 minutos).
- Realizar dos pasajes por alcohol 96° (aproximadamente 2 minutos cada pasaje).
- Lavar con agua destilada, a fin de preservar la calidad y el rendimiento del colorante en uso.
- Colorear:
-Con Hematoxilina de Harris durante 3 minutos o
-Con Hematoxilina Gill II o Gill III durante 1 minuto 30 segundos.
- Virar la Hematoxilina durante 5 minutos.
- Colorear con Eosina amarillenta solución 0,5% P/V durante 5 minutos.
- Lavar con agua hasta quitar el exceso de colorante.
- Realizar dos pasajes por alcohol 96° (aproximadamente 2 minutos).
- Realizar dos pasajes por alcohol 100° (aproximadamente 2 minutos).
- Realizar un pasaje por Pathoclear Plus, Xileno o BioClear.
- Montar con Bálsamo de Canadá sintético.
- Observar en microscopio óptico.
